大腸桿菌O157:H7顯色培養基(CT-SMAC 平板)(國標首選)

大影子dyz 發佈 2020-02-27T02:38:20+00:00

參考文獻1.HansenW. and Yourassawsky E., , J. Clin. Microbiol., 20:1177.2.Karmali M.A., Petric M., Lim C., et al, , J. Infect. Dis., 151-775.3.Th

大腸桿菌O157:H7顯色培養基(CT-SMAC 平板)(國標首選)

HiCrome™ MacConkey Sorbitol Agar Base


原理


麥康凱山梨醇瓊脂培養基 是根據Rappaport和Henigh的文獻描述而製備的[1]。培養基中含有山梨醇和BC指示劑,不含乳糖。用於鑑別大腸桿菌O157:H7腸道病原菌。

大多數大腸菌群菌株 會發酵山梨醇,產生酸。當pH值低於6.8時,培養基中的中性紅會變成粉紅色。同時普通大腸桿菌具有ß-D葡萄糖醛酸酶,當遇到培養基中BC指示劑時,會呈現藍綠色。當兩種顏色疊加時,普通大腸桿菌在此種培養基中,最終會呈現藍紫色。

大腸桿菌O157:H7不發酵山梨醇[2],也不具備ß-D葡萄糖醛酸酶活性[3],因而在此種培養基中產生的菌落為無色。

March和Ratnam報告[2],山梨醇麥康凱瓊脂培養基對大腸桿菌O157:H7的檢測具有100%的敏感性和85%的特異性,該培養基可作為篩選大腸桿菌O157:H7的可靠手段。

此培養基中:碳源、氮源及其它必要的生長營養素,由酪蛋白酶解產物和䏡蛋白腖提供;結晶紫和膽鹽會抑制大多數革蘭氏陽性菌生長;培養基中的氯化鈉維持滲透壓平衡。

如果需要,此培養基還可添加 碲酸鹽頭孢克肟添加劑(貨號:FD147),可使培養基更具有選擇性[4]。亞碲酸鉀可使大腸桿菌O157選擇性生長,並抑制嗜水氣單胞菌和普羅維登菌的生長;頭孢克肟可抑制變形桿菌。

註:假單胞菌在此培養基中也可產生無色菌落。若需對可疑菌落辨別,可進行氧化酶試驗,在5-10秒內觀察結果。

應用

HiCrome™麥康凱山梨醇瓊脂培養基推薦用於從食物和動物飼料中選擇性分離大腸桿菌O157:H7。

培養基成分

成分g/L

酪蛋白酶水解物17

䏡蛋白腖3

山梨醇10

膽鹽混合物1.5

氯化鈉5

結晶紫0.01

中性紅0.03

BC指示劑,01

瓊脂13.5

最終pH(25℃)7.1±0.2

配製

在495ml蒸餾水中溶解25.06克,加熱至沸騰以完全溶解。15磅滅菌(121°C)15分鐘。冷卻到45°C。混勻,倒入無菌培養皿。

如果需要添加液態碲酸鹽頭孢克肟添加劑(貨號:FD147),在無菌培養基冷卻前添加。

質量控制

● 外觀——淺黃色至粉紅色,單一自由流動粉末

● 成膠性——牢固,可與1.35%瓊脂凝膠相媲美

● 製備好的培養基的顏色和透明度——在培養皿中為紫紅色、澄清並稍不透明的凝膠形式

● 配比濃度——5.01%w/v(5.01g/100ml水)水溶液在25°C下pH為7.1±0.2

● pH值——6.90-7.30

培養結果

5-37°C孵育18-24小時後觀察培養特徵(如有必要,可延至48小時)。


參考文獻

1.Hansen W. and Yourassawsky E., (1984), J. Clin. Microbiol., 20:1177.

2.Karmali M.A., Petric M., Lim C., et al, (1985), J. Infect. Dis., 151-775.

3.Thompson et al. (1990). J. Clin. Microbiol. 29, 2165-2168.

4.Zadik P.M., Chapman P.A. and Siddons C.A., (1993), J. Med. Microbiol., 39, 155-158.

產品引用文獻

1. Sreepriya Prakasan, Parmanand Prabhakar, Manjusha Lekshmi, Sanath Kumar,Binaya Bhusan Nayak.Isolation of Shiga toxin-producing Escherichia coli harboring variant Shiga toxin genes from seafood.Vet World. 2018 Mar; 11(3): 379–385.

2. SK Manna, C Manna,et al.Serogroup distribution and virulence characteristics of sorbitol-negative Escherichia coli from food and cattle stool.Journal of Applied Microbiology, 2010, 108 (2) :658–665

3. KM Mbae,MK Ndwiga,FG Kiruki.Microbiological Quality of Kachumbari , a Raw Vegetable Salad Popularly Served Alongside Roast Meat in Kenya.Journal of Food Quality,2018,(35):1-7

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