最近，全球首個新冠病毒疫苗的臨床前試驗數據發布了。
北京科興中維生物技術有限公司聯合中國醫學科學院、中國科學院、浙江省疾控中心、中國疾控中心、軍事醫學科學院和國家食品藥品監督管理局開發的新冠病毒滅活疫苗，在小鼠、大鼠和恆河猴身上誘導出了中和抗體，能有效中和全球範圍內的10個代表性新冠病毒毒株，保護恆河猴免受新冠病毒感染。
這一研究發表在預印本平台biorxiv上[1]，尚未通過同行評審。
新冠病毒（來自NIAID-RML）
新冠疫情已經持續小半年了。對於傳染病，我們人類最有力的武器還是疫苗。憑藉疫苗，我們消滅了天花，接近消滅了脊髓灰質炎。目前，重組蛋白疫苗、腺病毒疫苗、核酸疫苗等等多種類型的新冠病毒疫苗都在研發當中。
這次，研究人員選擇研發的是較為傳統的滅活疫苗。滅活疫苗是使用被殺死的病毒誘導人體免疫，產生對疾病的抵抗力，安全性和效果都不錯，已廣泛用於流感、脊髓灰質炎等疾病的預防。
（來自pixabay.com）
研究人員從11名新冠肺炎患者的肺泡灌洗液中分離得到了11株新冠病毒。從中選取一株代號為CN2的病毒製作疫苗，另外10株則用來檢驗疫苗的效果。
這11名患者中，4人來自中國，4人來自義大利，還有3人分別來自瑞士、英國和西班牙。分離得到的11株病毒也廣泛分布在新冠病毒的系統發育樹上，在一定程度上可以代表全球流行的新冠病毒種群。
研究所用病毒毒株來源和在系統發育樹中的位置（預印本的圖都這麼糊嗎？）
要製作滅活疫苗，得先看看培養中病毒的遺傳穩定性怎麼樣。不然培養的病毒關鍵部位一突變，做出來的疫苗就沒用了。研究人員在Vero細胞中對CN2病毒進行了連續傳代。連續傳代中，新冠病毒遺傳穩定，其中的主要保護性抗原S蛋白沒有發生突變，中和抗體表位也沒有出現變化。
製作滅活疫苗可行！研究人員通過擴大培養、滅活病毒，經深層過濾和色譜純化，獲得了純化滅活新冠病毒疫苗（PiCoVacc）。
PiCoVacc在低溫電鏡下呈橢圓形顆粒，直徑90~150nm，具有冠狀突起，代表了病毒的預融合狀態。
PiCoVacc製作流程和電鏡照片（再次吐槽圖糊）
為了檢測PiCoVacc的疫苗效果，研究人員在第0天和第7天兩次給小鼠注射了0μg、1.5μg、3μg或6μg的PiCoVacc和鋁製佐劑。
接種疫苗後，小鼠血清中S蛋白特異性抗體迅速增加，在第6周達到峰值，抗體滴度達到819200，比恢復期患者血漿中的抗體滴度要高得多。其中，與受體結合域（RBD）結合的RBD特異性抗體滴度409600，占了一半。
PiCoVacc迅速誘導產生抗體
（顏色代表疫苗劑量，左、中、右分別是S蛋白抗體、RBD抗體和核衣殼抗體）
不過新冠肺炎患者血清中大量存在，可作為臨床診斷標誌物[2]，但不能提供保護[3]的新冠病毒核衣殼抗體，在接種PiCoVacc的小鼠血清中卻不多，只有S蛋白特異性抗體的1/30左右。
PiCoVacc誘導產生了更為有效的免疫應答！
在大鼠中的試驗也獲得了類似結果。而且接種PiCoVacc後的大鼠和小鼠血清，對其它新冠病毒毒株也有中和效果。
（來自pixabay.com）
恆河猴是一種非人靈長動物，感染新冠病毒可引起類似新冠肺炎的疾病[4]。接下來，研究人員在恆河猴中測試了PiCoVacc疫苗。
研究人員在第0、7、14天分三次給恆河猴接種了中劑量（3μg）或高劑量（6μg）的PiCoVacc。接種後，所有恆河猴均未出現發熱和體重減輕的現象，食慾和精神狀態也保持正常。S蛋白特異性抗體和中和抗體在接種後第二周開始產生。第三周時，兩組恆河猴血清中的S蛋白特異性抗體都達到了12800的抗體滴度，中和抗體滴度也達到了50，與恢復期患者血漿相似。
在第22天時，研究人員使用新冠病毒感染了這些恆河猴。所有的對照組恆河猴都在3~7天內出現了嚴重的間質性肺炎，咽、肛和肺部病毒RNA陽性，病毒載量還隨時間略微上升。
而接種過PiCoVacc的恆河猴，僅在肺部發生了很小的病變。感染後3~7天病毒載量逐漸下降。到第7天時，高劑量組的恆河猴，咽、口周和肺中已經檢測不到病毒，中劑量組的病毒載量也比對照組低了95%。
對照組恆河猴出現嚴重的間質性肺炎（左），接種疫苗的恆河猴盡在局部出現輕微的間質性肺炎（中），其餘肺組織保持正常（右）
試驗中也沒有發現抗體依賴性感染增強（ADE）現象。
PiCoVacc在恆河猴中可以安全有效的預防新冠肺炎！
目前，相關的臨床試驗已經開始。希望試驗進展順利，新冠肺炎早日得到控制。
編輯神叨叨
由奇點糕歷時3個月打造的音頻課程《小細胞肺癌8講》重磅上線啦～ 我們用8講的課程，幫您回顧了小細胞肺癌領域近30年來的重要探索和進展。只需80分鐘，即可縱覽小細胞肺癌領域的前沿學術進展。
此外，我們還準備了少量紙質版講義，購買課程後加主編微信即可免費申領，先到先得！
參考文獻：
1. GAO Q, BAO L, MAO H, et al. 2020. Rapid development of an inactivated vaccine for SARS-CoV-2. bioRxiv [J]: 2020.2004.2017.046375.
2. Liu L, Liu W, Wang S, et al. A preliminary study on serological assay for severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) in 238 admitted hospital patients[J]. medRxiv, 2020.
3. Gralinski L E, Menachery V D. Return of the Coronavirus: 2019-nCoV[J]. Viruses, 2020, 12(2): 135.
4. Yu P, Qi F, Xu Y, et al. Age‐related rhesus macaque models of COVID‐19[J]. Animal Models and Experimental Medicine, 2020.
頭圖來自NIAID-RML
本文作者 | 孔劭凡