文題釋義：

骨碎補總黃酮：是由水龍骨科植物槲蕨的乾燥根莖中提取的有效成分，骨碎補總黃酮能夠促進成骨細胞增殖，抑制破骨細胞成熟分化。

Wnt/β-catenin信號通路：是一類高度保守的信號通路，廣泛存在於多細胞真核生物中，是皮膚發育過程中出現最早的分子信號，調控毛囊的生長發育和毛囊幹細胞的遷移分化。β-catenin作為細胞內信號傳導蛋白，是Wnt信號通路激活的一種重要的上皮細胞表面黏附分子，能夠進入細胞核內傳遞Wnt信號，進一步激活靶基因開始轉錄，啟動細胞增殖周期。

背景：前期研究發現，骨碎補總黃酮可促進納米骨材料表面MC3T3-E1細胞的成骨分化，其作用機制有待進一步研究。

目的：探究骨碎補總黃酮聯合納米骨材料對MC3T3-E1細胞發揮作用的機制。

方法：將MC3T3-E1細胞與納米骨材料共培養，選取100 mg/L和250 mg/L骨碎補總黃酮進行藥物干預，以10 μg/L轉化生長因子β刺激為陽性對照組。分組如下：①正常組；②DKK1組：Wnt通路抑制劑DKK1 (0.1 mg/L)阻斷Wnt/β-catenin信號通路；③DKK1+轉化生長因子β組；④DKK1+100 mg/L骨碎補總黃酮組；⑤DKK1+250 mg/L骨碎補總黃酮組；⑥DKK1+納米骨+轉化生長因子β組；⑦DKK1+納米骨+100 mg/L骨碎補總黃酮組；⑧DKK1+納米骨+250 mg/L骨碎補總黃酮組。在干預24，48 h後收穫細胞，免疫螢光雙染法觀察Wnt/β-catenin通路中Wnt與LRP結合情況，Real-time PCR和Western blot檢測β-catenin、LRP5、Gsk-3β、Cyclin D1、RUNX2的表達。

結果與結論：①雷射共聚焦掃描顯微鏡下顯示DKK1+轉化生長因子β組、DKK1+250 mg/L骨碎補總黃酮組、DKK1+納米骨+轉化生長因子β組、DKK1+納米骨+250 mg/L骨碎補總黃酮組棕黃色染色較明顯，表明Wnt與LRP結合較其他組更好；②Real-time PCR和Western blot結果顯示，骨碎補總黃酮可促進β-catenin、LRP5、RUNX2的表達，下調GSK-3β的表達，說明骨碎補總黃酮通過激活經典Wnt/β-catenin 信號通路促進成骨細胞增殖分化，且骨碎補總黃酮誘導的基因活化呈劑量依賴性。

ORCID: 0000-0002-2031-8644(李晉玉)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點：幹細胞；骨髓幹細胞；造血幹細胞；脂肪幹細胞；腫瘤幹細胞；胚胎幹細胞；臍帶臍血幹細胞；幹細胞誘導；幹細胞分化；組織工程

關鍵詞: 骨碎補總黃酮, 納米骨, Wnt/β-catenin信號通路, 成骨細胞, MC3T3-E1細胞

文章來源: 李晉玉, 俞興, 姜俊傑, 徐林, 趙學千, 孫旗, 鄭晨穎, 白春曉, 劉楚吟, 賈育松.骨碎補總黃酮聯合納米骨材料促進MC3T3-E1細胞的增殖分化 [J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(7): 1030-1036.