HBV 與非肝細胞的研究

作為人嗜肝病毒，B肝病毒主要在人體肝臟內複製並造成損害。

但在同一時間，HBV在肝外組織的其它細胞類型內被發現，如淋巴結，脾，腎，腎上腺周圍神經節和睪丸。

這些組織中的HBV病毒複製在肝外綜合徵的發病機理中可能起了重要作用。有研究先前報導了從CHB患者分離出的精子染色體中存在HBV DNA。而實驗也表明HBV基因也可以在源自倉鼠卵母細早期胚胎細胞表達，同時HBV的感染也對人類精子產生不利影響，導致精子線粒體膜電位的損失，精子活力下降。

但是，同時該研究也發現去唾液酸糖蛋白受體（ASGR）在人的睪丸中未表達，這表明HBV可能通過其他受體侵入精原細胞。儘管已有了這些非肝細胞感染HBV的研究，但對非肝細胞中HBV感染所需的宿主因素仍然只有部分了解。

目前，用於研究肝外HBV感染的細胞培養模型是有限的。基於肝癌細胞培養模型如HepG2和Huh7被廣泛用於HBV研究。

然而，從這些人類肝癌細胞中表達的大量肝臟富集基因中鑑定出HBV感染的關鍵因素並非易事。在非肝細胞中重建HBV感染將確定支持HBV進入，轉錄和複製的宿主因子。

HBV感染相關因素

迄今為止，已經發現了與HBV感染和複製有關的多種因素。B肝病毒的進入可以通過硫酸乙醯肝素蛋白聚糖（HSPG）來介導，例如Glypican-5（GPC5），牛磺膽酸鈉共轉運多肽（NTCP）。

HBV轉錄也受肝臟富集的轉錄因子如肝細胞核因子（HNF）的調節，包括HNF1，HNF3和HNF4，CCAAT /增強子結合蛋白（C / EBP）以及核激素受體（如RXRa和PPARa）。

HBV感染的初始步驟涉及病毒與靶細胞表面上的受體結合和引發病毒進入。HBV的preS1結構域介導病毒與其靶細胞的附著。HBV顆粒以preS1抑制的過程結合ASGR，也表明ASGR促進了HBV感染。

此外，研究也表明HBV感染的第一步還需要HSPG（例如GPC5）。

目前的研究表明牛磺膽酸鈉共轉運多肽（NTCP）是一個最重要的關於HBV感染的細胞受體。NTCP與preS1的N末端域發生物理相互作用，並介導病毒進入肝細胞。過表達NTCP的肝癌細胞系易受HBV感染。

但是NTCP在人非肝細胞和肝癌細胞中的表達低於人原代肝細胞，這限制HBV進入這些細胞。

此外，由於缺乏一些肝臟富集的轉錄因子，非肝源性細胞系不能獨立支持HBV複製。即使將含HBV的質粒轉染到小鼠非肝NIH3T3細胞中，也無法檢測到HBV前基因組RNA（pgRNA）。

肝富集轉錄因子，如肝細胞因子和類視黃醇X受體α（RXRα），可以結合HBV啟動子和調節HBV基因的轉錄。而且核激素受體（HNF4α，RXRα，PPARα）對於pgRNA合成和病毒複製至關重要。

HBV感染非肝細胞最新進展

來自我國汕頭大學的研究人員對非肝細胞293T的HBV感染進行研究。為了在非肝細胞中重建HBV感染，研究在293T細胞中高表達了參與HBV進入，轉錄和複製的多個基因。

在這項研究中，研究顯示核激素受體HNF4α，RXRα和PPARα以及HBV受體NTCP的共表達支持293T細胞中HBV的進入和複製。

該模型將有助於研究非肝細胞中的HBV感染以及HBV肝向性所需的宿主因子。

參考文獻：Defined host factors support HBV infection in non‐hepatic 293T cells